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方法 IP 346
工作原理: 將一定重量的油(通常為4克)溶解在環己烷中,然后用二甲基亞砜連續提取兩次。將鹽溶液加入到聯合的 DMSO 提取物中以沉淀提取的化合物,然后將其反萃取成環己烷。所得到的溶液經過處理以除去水分,然后轉移到焦油燒瓶中,通過旋轉蒸發除去環己烷。燒瓶稱重,殘渣的重量通過從最終重量減去焦油重量來確定。得到的值表示為 DMSO- 提取物的重量百分比。終點: IP 346檢測的終點是從測試材料中提取到 DMSO 中的物質的重量百分比。
結果解釋: 歐盟委員會已經授權使用方法 IP 346作為標記某些石油精煉流的致癌潛力的基礎。這些包括餾分范圍內的所有流體 * ,但一般不包括那些來自真空渣油。該標準要求 PAC 含量大于或等于3% (w/w)的油被標記為潛在致癌物。* 在使用規定的蒸餾程序進行化驗之前,預計沸騰溫度低于300攝氏度的大量物質的輕流必須“加滿",PetroLabs 目前沒有提供這項服務。物流: 參見修改后的 Ames 測試產品: 我們嚴格按照石油學會出版物中描述的程序執行方法 IP 346。
硝化試驗
背景: 硝化分析法是一種靈敏的方法,用于定量化石燃料衍生的復雜混合物、燃燒產物和大量相關環境樣品中多環芳烴(PAC)的相對含量。該方法依賴于 Ames Test 細菌菌株 TA98對硝基 PAC 介導的誘變性的極敏感性,以及許多 PAC 可被化學硝化的相對容易性。由于該分析法測量的是化學硝化衍生物的致突變效力,而不是母體 PAC 本身,因此不能直接測量試驗材料的潛在致癌性。
工作原理: 程序的第一步是用化學方法對試驗材料進行硝酸鹽化學處理,通常是將試驗材料與80攝氏度的濃硝酸反應30分鐘。應當指出,對于具有最大生物利益的多氯聯苯(其中包括 EPA 優先污染物)來說,不需要這種苛刻的反應條件,因為未烷化和輕度烷化的化合物在室溫下幾乎立即被硝化。這里使用的更嚴格的處理確?;衔锔脱苌磻?,從而提高了該方法的靈敏度。但是,即使在如此嚴格的反應條件下,已經表明只有 PAC 被衍生化,這是賦予其近乎絕對化學選擇性的方法的一個特點。硝化反應完成后,樣本會冷卻至室溫,然后用二氯甲烷萃取。一定體積的提取物被移到一個新的試管中,二氯甲烷被剝離,產生的殘余物重組成二甲基亞砜(DMSO)用于埃姆斯測試。用于此目的的 Ames 測試的版本是所謂的“非活化測定",這種方法的特征之所以成為可能,是因為所使用的測試菌株(TA98)具有將 nitroPAC 活化為其誘變形式所必需的內源性硝基還原酶,使得添加外源代謝混合物(S-9)不必要。該測試的這個方面賦予其相對于 S-9依賴性測定(如改良 Ames 測試)的高得多的靈敏度,因為 DNA 加合物種是在細菌內產生的,并且不需要通過細胞壁運輸來達到其最終的 DNA 靶標。此外,硝基芳烴是典型試驗材料中可能發現的唯不依賴于 S-9的誘變劑,這一事實意味著該方法不僅在化學上對 PAC 具有選擇性,而且在生物學上也具有選擇性。
終點: 硝化試驗的終點直接類似于改良 Ames 試驗的終點,即致突變性劑量-反應曲線的斜率。在硝化試驗中,它被稱為硝化致突變性指數(NMI)。NMI 的解釋: 如上所述,NMI 并不直接預測致癌潛力。相反,它被用來作為比較各種組成相關的復雜混合物的相對 PAC 含量的一種手段,與有時使用 IP 346和其他分析方法的方法非常相似。然而,由于在修改的 Ames 試驗和硝化試驗中測量的致突變性與 PAC 濃度直接成比例,因此應該可以為具有非常相似的組分分布的煉油廠流體開發兩個終點之間的相關曲線。
用途: 硝化試驗適用于任何含有聚合氯化鋁的樣品。對于樣本容量或 PAC 濃度過低的環境或生物監測樣品,如改良 Ames 試驗和方法 IP 346等標準方法尤其有用。它已成功地應用于以下領域: 1。煉油廠流體,金屬加工液,精煉油,燃燒產品的檢驗。2.測試空氣、水和土壤,作為繪制污染物分布圖和監測受污染場地清理作業效果的一種手段。3.尿中 PAC 代謝產物的生物監測研究。4.PAC 從基質(如瀝青)中的可浸出性。5.生物樣品中相對 PAC 含量的測定。物流: 參見修改后的埃姆斯測試。工作成果: 我們將與贊助商合作,使研究適合他們的個人需要。
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